摘要
本发明涉及一种由毕赤酵母表达串联蛋白的纯化工艺。具体地,本发明提供一种重组人胰岛素原C肽串联蛋白的纯化方法,包括步骤:(1)对发酵液进行离心,得到发酵离心上清液;(2)加入电解质进行盐析,得到沉淀蛋白;(3)加入复溶剂,得到沉淀蛋白复溶液;(4)沉淀蛋白复溶液经第一柱层析纯化;(5)加入胰蛋白酶和羧肽酶B进行双酶切,得到酶切液;(6)对所述的酶切液依次进行反相超滤和正相超滤,得到超滤液;(7)所述的超滤液经第二柱层析纯化;(8)进行正相超滤,得到重组人胰岛素原C肽原液。本发明所述方法能够制备高纯度和高收率的重组人胰岛素原C肽。