一种由毕赤酵母表达串联蛋白的纯化工艺
申请号
2018116020696
申请日期
2018/12/26
公布号
CN111363025A
公布日
2020/07/03
专利类型
发明公布
分类号
C07K14/62(2006.01)I;
申请人
上海新生源医药集团有限公司
浙江浙新医药科技有限公司
发明人
贾伟平
李校堃
程萍
倪晶
代理机构
上海一平知识产权代理有限公司31266
申请人地址
上海市浦东新区中国（上海）自由贸易试验区蔡伦路780号208室
申请人邮编
201203
摘要
本发明涉及一种由毕赤酵母表达串联蛋白的纯化工艺。具体地，本发明提供一种重组人胰岛素原C肽串联蛋白的纯化方法，包括步骤：(1)对发酵液进行离心，得到发酵离心上清液；(2)加入电解质进行盐析，得到沉淀蛋白；(3)加入复溶剂，得到沉淀蛋白复溶液；(4)沉淀蛋白复溶液经第一柱层析纯化；(5)加入胰蛋白酶和羧肽酶B进行双酶切，得到酶切液；(6)对所述的酶切液依次进行反相超滤和正相超滤，得到超滤液；(7)所述的超滤液经第二柱层析纯化；(8)进行正相超滤，得到重组人胰岛素原C肽原液。本发明所述方法能够制备高纯度和高收率的重组人胰岛素原C肽。
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